ข้อมูล

1.4.6.18: การคัดเลือกโดยธรรมชาติ - ชีววิทยา

1.4.6.18: การคัดเลือกโดยธรรมชาติ - ชีววิทยา


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

วัตถุประสงค์การเรียนรู้

  • กำหนดการคัดเลือกโดยธรรมชาติ

ดาร์วินและโคตรที่มีการดัดแปลง

Charles Darwin เป็นที่รู้จักกันเป็นอย่างดีในการค้นพบการคัดเลือกโดยธรรมชาติของเขา ในช่วงกลางศตวรรษที่สิบเก้า กลไกที่แท้จริงของวิวัฒนาการได้รับการคิดและอธิบายโดยนักธรรมชาติวิทยาสองคน: Charles Darwin และ Alfred Russel Wallace ที่สำคัญ นักธรรมชาติวิทยาแต่ละคนใช้เวลาสำรวจโลกธรรมชาติในการเดินทางไปยังเขตร้อน ตั้งแต่ปี พ.ศ. 2374 ถึง พ.ศ. 2379 ดาร์วินเดินทางไปทั่วโลกบน ร. บีเกิ้ลรวมถึงจุดแวะพักในอเมริกาใต้ ออสเตรเลีย และตอนใต้สุดของแอฟริกา วอลเลซเดินทางไปบราซิลเพื่อเก็บแมลงในป่าฝนอเมซอนระหว่างปี พ.ศ. 2391 ถึง พ.ศ. 2395 และไปยังหมู่เกาะมาเลย์ตั้งแต่ปี พ.ศ. 2397 ถึง พ.ศ. 2405 การเดินทางของดาร์วินเช่นการเดินทางสู่หมู่เกาะมลายูในภายหลังของวอลเลซรวมถึงการหยุดที่เกาะหลายเกาะซึ่งสุดท้ายคือหมู่เกาะกาลาปากอส ทางตะวันตกของเอกวาดอร์ บนเกาะเหล่านี้ ดาร์วินสังเกตสิ่งมีชีวิตบนเกาะต่างๆ ที่มีความคล้ายคลึงกันอย่างชัดเจน แต่ก็มีความแตกต่างที่ชัดเจน ตัวอย่างเช่น นกฟินช์พื้นที่อาศัยอยู่ในหมู่เกาะกาลาปากอสประกอบด้วยหลายสายพันธุ์ที่มีรูปร่างปากนกที่เป็นเอกลักษณ์ (รูปที่ 1)

สปีชีส์บนเกาะมีชุดขนาดและรูปร่างของจงอยปากอย่างช้าๆ โดยมีความแตกต่างกันเล็กน้อยระหว่างสิ่งที่คล้ายคลึงกันมากที่สุด เขาสังเกตเห็นว่านกฟินช์เหล่านี้มีความคล้ายคลึงกับนกฟินช์สายพันธุ์อื่นบนแผ่นดินใหญ่ของทวีปอเมริกาใต้อย่างใกล้ชิด ดาร์วินจินตนาการว่าสายพันธุ์เกาะอาจเป็นสายพันธุ์ที่ดัดแปลงมาจากสายพันธุ์ดั้งเดิมบนแผ่นดินใหญ่ จากการศึกษาเพิ่มเติม เขาตระหนักว่าจงอยปากที่หลากหลายของนกฟินช์แต่ละตัวช่วยให้นกได้รับอาหารเฉพาะประเภท ตัวอย่างเช่น นกฟินช์กินเมล็ดมีจะงอยปากที่หนากว่าสำหรับแตกเมล็ด และนกฟินช์กินแมลงมีจะงอยปากเหมือนหอกสำหรับแทงเหยื่อ

วอลเลซและดาร์วินต่างก็สังเกตเห็นรูปแบบที่คล้ายคลึงกันในสิ่งมีชีวิตอื่น และพวกเขาได้พัฒนาคำอธิบายเดียวกันว่าการเปลี่ยนแปลงดังกล่าวเกิดขึ้นได้อย่างไรและเหตุใด ดาร์วินเรียกกลไกนี้ว่าการคัดเลือกโดยธรรมชาติ การคัดเลือกโดยธรรมชาติหรือเรียกอีกอย่างว่า "การอยู่รอดของผู้ที่เหมาะสมที่สุด" คือการสืบพันธุ์ของบุคคลที่มีคุณสมบัติเด่นที่รอดพ้นจากการเปลี่ยนแปลงของสิ่งแวดล้อมเนื่องจากลักษณะเหล่านั้นได้อย่างอุดมสมบูรณ์มากขึ้น สิ่งนี้นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงทางวิวัฒนาการ

ตัวอย่างเช่น ประชากรของเต่ายักษ์ที่พบในหมู่เกาะกาลาปากอสถูกสังเกตโดยดาร์วินว่ามีคอที่ยาวกว่าเต่าที่อาศัยอยู่บนเกาะอื่นที่มีที่ราบลุ่มที่แห้งแล้ง เต่าเหล่านี้ถูก "เลือก" เพราะพวกมันสามารถเอื้อมถึงใบไม้และเข้าถึงอาหารได้มากกว่าเต่าคอสั้น ในฤดูแล้งที่มีใบน้อย ใบที่ใบได้มากจะมีโอกาสกินและอยู่รอดได้ดีกว่าใบที่ไม่สามารถไปถึงแหล่งอาหารได้ ด้วยเหตุนี้ เต่าคอยาวจึงมีแนวโน้มที่จะประสบความสำเร็จในการสืบพันธุ์และถ่ายทอดลักษณะเฉพาะของเต่าคอยาวไปยังลูกหลานของพวกมัน เมื่อเวลาผ่านไป จะมีเพียงเต่าคอยาวเท่านั้นที่จะปรากฏในประชากร

ดาร์วินแย้งว่าการคัดเลือกโดยธรรมชาติเป็นผลที่หลีกเลี่ยงไม่ได้ของหลักการสามประการที่ทำงานในธรรมชาติ ประการแรกลักษณะส่วนใหญ่ของสิ่งมีชีวิตนั้นสืบทอดหรือถ่ายทอดจากพ่อแม่สู่ลูก แม้ว่าไม่มีใคร รวมทั้งดาร์วินและวอลเลซ รู้ว่าเหตุการณ์นี้เกิดขึ้นได้อย่างไรในขณะนั้น แต่ก็เป็นความเข้าใจทั่วไป ประการที่สอง มีการผลิตลูกหลานมากกว่าที่จะสามารถอยู่รอดได้ ดังนั้นทรัพยากรเพื่อการอยู่รอดและการสืบพันธุ์จึงมีจำกัด ความสามารถในการสืบพันธุ์ในสิ่งมีชีวิตทุกชนิดมีมากกว่าทรัพยากรที่มีอยู่เพื่อรองรับจำนวนของมัน จึงมีการแข่งขันแย่งชิงทรัพยากรเหล่านั้นในแต่ละรุ่น ความเข้าใจหลักการนี้ทั้งดาร์วินและวอลเลซมาจากการอ่านบทความของนักเศรษฐศาสตร์โธมัส มัลธัส ซึ่งกล่าวถึงหลักการนี้เกี่ยวกับประชากรมนุษย์ ประการที่สาม ลูกหลานมีความแตกต่างกันตามลักษณะเฉพาะและการแปรผันเหล่านั้นเป็นกรรมพันธุ์ ดาร์วินและวอลเลซให้เหตุผลว่าลูกหลานที่มีลักษณะเฉพาะที่สืบทอดมาซึ่งทำให้พวกเขาสามารถแข่งขันได้ดีที่สุดสำหรับทรัพยากรที่จำกัดจะอยู่รอดและมีลูกหลานมากกว่าบุคคลที่มีความหลากหลายที่ไม่สามารถแข่งขันได้ เนื่องจากคุณลักษณะต่าง ๆ ได้รับการสืบทอด ลักษณะเหล่านี้จึงจะแสดงได้ดีขึ้นในรุ่นต่อไป สิ่งนี้จะนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงของประชากรจากรุ่นสู่รุ่นในกระบวนการที่ดาร์วินเรียกว่าการสืบเชื้อสายที่มีการดัดแปลง ในท้ายที่สุดการคัดเลือกโดยธรรมชาติจะนำไปสู่การปรับตัวของประชากรให้เข้ากับสภาพแวดล้อมในท้องถิ่นมากขึ้น มันเป็นกลไกเดียวที่รู้จักสำหรับวิวัฒนาการแบบปรับตัว

เอกสารโดยดาร์วินและวอลเลซ (รูปที่ 2) ที่นำเสนอแนวคิดเรื่องการคัดเลือกโดยธรรมชาติถูกอ่านร่วมกันในปี 1858 ก่อน Linnean Society ในลอนดอน หนังสือของดาร์วินในปีถัดมา เกี่ยวกับต้นกำเนิดของสายพันธุ์, ถูกตีพิมพ์. หนังสือของเขามีรายละเอียดมากเกี่ยวกับข้อโต้แย้งของเขาเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงทีละน้อยและการอยู่รอดแบบปรับตัวโดยการคัดเลือกโดยธรรมชาติ

การสาธิตวิวัฒนาการโดยการคัดเลือกโดยธรรมชาตินั้นใช้เวลานานและหาได้ยาก ตัวอย่างที่ดีที่สุดตัวอย่างหนึ่งแสดงให้เห็นในนกที่ช่วยสร้างแรงบันดาลใจให้กับทฤษฎีของดาร์วิน นั่นคือ นกฟินช์กาลาปากอส Peter และ Rosemary Grant และเพื่อนร่วมงานของพวกเขาได้ศึกษาประชากรนกฟินช์กาลาปากอสทุกปีตั้งแต่ปี 1976 และได้จัดให้มีการสาธิตที่สำคัญของการคัดเลือกโดยธรรมชาติ Grants พบการเปลี่ยนแปลงจากรุ่นหนึ่งไปสู่รุ่นถัดไปในการกระจายรูปร่างของจงอยปากด้วยนกฟินช์พื้นกลางบนเกาะ Daphne Major ของกาลาปากอส นกเหล่านี้ได้รับการเปลี่ยนแปลงในรูปทรงปากนก โดยนกบางตัวมีปากที่กว้างและบางตัวมีปากที่บางกว่า ในช่วงเวลาที่ฝนตกมากกว่าปกติเนื่องจากเอลนีโญ เมล็ดแข็งขนาดใหญ่ที่นกปากใหญ่กินเข้าไปมีจำนวนลดลง อย่างไรก็ตาม มีเมล็ดอ่อนขนาดเล็กจำนวนมากที่นกปากเล็กกินเข้าไป ดังนั้นการอยู่รอดและการสืบพันธุ์จึงดีขึ้นมากในปีต่อๆ มาสำหรับนกปากเล็ก ในปีต่อจากเอลนีโญ แกรนท์ได้วัดขนาดปากนกในประชากร และพบว่าขนาดบิลเฉลี่ยนั้นเล็กกว่า เนื่องจากขนาดใบเรียกเก็บเงินเป็นลักษณะที่สืบทอดมา พ่อแม่ที่มีใบเรียกเก็บเงินที่เล็กกว่าจึงมีลูกหลานมากกว่าและขนาดของใบเรียกเก็บเงินก็เล็กลง เมื่อสภาพดีขึ้นในปี 2530 และเมล็ดพันธุ์ที่ใหญ่ขึ้นก็มีมากขึ้น แนวโน้มไปสู่ขนาดบิลเฉลี่ยที่เล็กลงก็หยุดลง


ภาษาสามารถพัฒนาได้อย่างไร?

Affiliations Cognitive Neurobiology and Helmholtz Institute, Departments of Psychology and Biology, Utrecht University, Utrecht, The Netherlands, Department of Zoology and Sidney Sussex College, University of Cambridge, Cambridge, สหราชอาณาจักร

แผนกมานุษยวิทยาสังกัด American Museum of Natural History, นิวยอร์ก, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา

ภาควิชาภาษาศาสตร์และปรัชญา MIT เมืองเคมบริดจ์ รัฐแมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา

ภาควิชาวิศวกรรมไฟฟ้าและวิทยาการคอมพิวเตอร์และสมองและวิทยาศาสตร์ทางปัญญา, MIT, เคมบริดจ์, แมสซาชูเซตส์, สหรัฐอเมริกา


การคัดเลือกโดยธรรมชาติและลำดับ BRCA1 ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม: การระบุตำแหน่งที่สำคัญในการทำงานที่เกี่ยวข้องกับความอ่อนแอต่อมะเร็งเต้านมในมนุษย์

การเปรียบเทียบลำดับของยีน orthologous เกิดขึ้นเป็นแนวทางที่มีประสิทธิภาพในการอธิบายตำแหน่งที่มีความสำคัญทางหน้าที่ในยีนโรคของมนุษย์ ด้วยการใช้อาร์เรย์ที่หลากหลายของลำดับ BRCA1 (exon 11) ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม 132 ตัว เราประเมินความสำคัญเชิงหน้าที่ของไซต์เฉพาะในบริบทของข้อมูลการคัดเลือก (การทำให้บริสุทธิ์ เป็นกลาง หรือกระจายความเสี่ยง) ตลอดจนความสามารถในการดึงข้อมูลดังกล่าวจากการจัดตำแหน่งที่ดัชนีแตกต่างกัน องศาของความหลากหลายของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ชุดข้อมูลขนาดเล็กของแท็กซ่าที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด (ไพรเมต) หรืออนุกรมวิธานของรกต่างกันไม่สามารถแยกความแตกต่างของไซต์ที่อนุรักษ์ไว้ได้เนื่องจากการเลือกที่บริสุทธิ์จากไซต์ที่อนุรักษ์ไว้เนื่องจากโอกาส (อัตราบวกเท็จ = 65% -99%) การเพิ่มจำนวนของแท็กซ่าของรกเป็น 57 ช่วยลดอัตราที่ผิดพลาดที่อาจเกิดขึ้นได้อย่างมาก (0%-1.5%) ด้วยการใช้ชุดข้อมูลที่ใหญ่ขึ้น เราจัดอันดับความเสี่ยงในการก่อมะเร็งของการกลายพันธุ์ที่ผิดพลาดของมนุษย์โดยใช้วิธีการใหม่ซึ่งรวมเอาระดับการเลือกเฉพาะไซต์และความรุนแรงของการเปลี่ยนแปลงกรดอะมิโนที่ประเมินเทียบกับกรดอะมิโนที่มีอยู่ในแท็กซ่าของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมอื่นๆ นอกจากไซต์ที่ได้รับการคัดเลือกในเชิงบวกใน Marsupialia, Laurasiatheria, Euarchontoglires และ Primates แล้ว เราระบุไซต์ที่มีแนวโน้มว่าจะอยู่ภายใต้แรงกดดันในการคัดเลือกที่แตกต่างกันในสายเลือดต่างๆ และไซต์ที่อาจโต้ตอบกันหกคู่ ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นถึงความจำเป็นในการรวมลำดับจำนวนมากเพื่ออธิบายตำแหน่งที่มีความสำคัญทางหน้าที่ของโปรตีนเมื่อใช้วิธีการวิวัฒนาการเชิงเปรียบเทียบ


2. ชีววิทยาและนิเวศวิทยาหมัดแมว

บทวิจารณ์ทั่วไปหลายประการของ ค. ฉ. เฟลิส ชีววิทยาได้รับการตีพิมพ์ตั้งแต่ปี 1997 [3,4,5,6,7,8,9,10,11] ความเข้าใจของเราเกี่ยวกับการกระจายทางภูมิศาสตร์ของ ค. ฉ. เฟลิส และโฮสต์สำรองยังคงขยายตัวต่อไป ค. ฉ. เฟลิส เป็นศัตรูพืชทั่วโลกอย่างแท้จริงและภาวะโลกร้อนอาจจะไม่ส่งผลกระทบต่อการกระจายของหมัดแมว ความคงอยู่ภายนอกที่ต่ำของ ค. ฉ. เฟลิสแหล่งเพาะพันธุ์ในร่ม วัฏจักรชีวิตที่เชี่ยวชาญเป็นพิเศษ และความต้องการอุณหภูมิและความชื้นจำเพาะสำหรับการพัฒนา ล้วนเป็นปัจจัยที่บ่งชี้ว่าการกระจายตัวของหมัดแมวจะยังคงเหมือนเดิม [12] อย่างไรก็ตาม ด้วยอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้น จำนวนรุ่นต่อปีและความหนาแน่นของหมัดแมวอาจเพิ่มขึ้นอย่างมาก

หมัดแมวเป็นของ Order Siphonaptera และตระกูล Pulicidae ภายในวงศ์ Pulicidae สกุล Ctenocephalides ได้ผ่านการแก้ไขครั้งใหญ่ด้วยการถือกำเนิดของระบบโมเลกุลและการทบทวนที่สำคัญของลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่มีอยู่ ตัวละครที่อยู่บนอีเดียกัส เช่น แฮมลัส กลีบ และหลอดอาหาร ทำให้สามารถจำแนกชนิดของ Ctenocephalides [13]. อย่างไรก็ตาม การมีอยู่ของความแปรผันทางสัณฐานวิทยาของอักขระที่ใช้ในการแยกแยะ ค. ฉ. เฟลิส และ C. canis กำหนดให้ใช้ข้อมูลโฮสต์ การกระจายทางภูมิศาสตร์ และความชุกของการระบาดในการพิจารณา [14,15] จากมุมมองที่เป็นระบบ หมัดแมวสี่ชนิดย่อยมีอยู่เป็นเวลาหกทศวรรษ ได้แก่ ค. felis damarensis, ค. เฟลิส เฟลิส, C. felis orientis, และ C. felis strongylus [16]. ลำดับนิวคลีโอไทด์ ITS1 และ ITYS2 และลำดับ 16SrDNA ไม่แปรผันในจำนวน ค. เฟลิส ประชากรที่รวบรวมทั่วโลกและการค้นพบโดยรวมไม่สนับสนุนชนิดย่อยของ ค. เฟลิส [17]. มีการระบุไมโครแซทเทิลไลต์หลายตัวที่สามารถช่วยในการระบุสายพันธุ์เฉพาะของ . ได้หรือไม่ ค. ฉ. เฟลิส มีอยู่ การมีอยู่ของชนิดย่อย และการศึกษาทางระบาดวิทยาโดยละเอียดของ Rickettsia felis [18]. ลำดับของหน่วยย่อย cytochrome c oxidase cox1 และ ค็อกซ์2 แสดงว่า ค. ฉ. เฟลิส และ ค. ฉ. Strongylus เป็นอัมพาตและ ค. ฉ. orientis เป็นแบบ monophyletic [19] สามกลุ่มที่แตกต่างกันของ ค. ฉ. เฟลิส ถูกพบ. การศึกษาที่คล้ายกันกับหน่วยย่อย cox1 และ cox2 เปิดเผยว่า ค. ฉ. เฟลิส จากนิวซีแลนด์เป็นของ Clade 1 เช่นเดียวกับของออสเตรเลียและยุโรป [20] ไม่พบรูปแบบเฉพาะเจาะจงที่เครื่องหมาย ITS1 สำหรับ 52 ค. ฉ. เฟลิส ตัวอย่างที่วิเคราะห์จากสถานที่ต่างๆ 17 แห่งในภาคกลางตอนใต้ของสหรัฐอเมริกา บ่งชี้ว่าเป็นคอขวดทางพันธุกรรมหรือเพิ่งได้รับการแนะนำ [21] ประชากรของ ค. ฉ. เฟลิส และ C. canis จากสเปน อิหร่าน และแอฟริกาใต้ได้รับการตรวจสอบและดำเนินการลำดับ ITS1 ทั้งสองสายพันธุ์ถูกแยกออกจากกันอย่างชัดเจน [22] เทคนิคแมสสเปกโตรเมตรี (MALDI-TOF MS) ที่ใช้เลเซอร์ช่วยการดูดซับ/ไอออนไนซ์เวลาบินเพื่อระบุชนิดศัตรูพืชที่สำคัญของหมัด ตัวอย่างสดเพียงชิ้นเดียวให้การจำแนกชนิดที่ชัดเจน ตัวอย่างที่เก็บรักษาไว้ในเอทานอลให้ผลลัพธ์ที่เปลี่ยนแปลงได้ขึ้นอยู่กับระยะเวลาในเอทานอล [23]

ความพยายามอย่างเป็นระบบเมื่อเร็ว ๆ นี้รวมถึงเทคนิคระดับโมเลกุลได้ยกระดับสองสายพันธุ์ย่อยเป็นสปีชีส์ที่สมบูรณ์ ค. ดามาเรนซิส และ ค. orientis [13,24]. ค. ฉ. เฟลิส พบเฉพาะในแมวและสุนัขในขณะที่ ค. ฉ. Strongylus พบในฟาร์มเลี้ยงสัตว์ขนาดใหญ่ในลิเบียเท่านั้น [25] ในแอฟริกาใต้ ค. ฉ. Strongylus ได้ถูกรวบรวมไว้บนแมวป่า คาราคัล คาราคัล และสุนัขบ้านในพื้นที่ชนบท [26]. อาจจะ ค. ฉ. Strongylus จะถูกยกระดับเป็นสปีชีส์ในอนาคตด้วย

เพื่อความกระชับ ค. เฟลิส เฟลิส จะเรียกว่า ค. เฟลิส.

2.1. การกระจายทางภูมิศาสตร์และโฮสต์

การสำรวจปรสิตภายนอกของสัตว์เลี้ยงจำนวนมากได้ดำเนินการไปทั่วโลก และได้รับการตรวจสอบโดยสังเขปตามลำดับตามทวีป ภูมิภาค และประเทศ การตรวจสอบหมัดของเจ้าภาพในวงศ์ Canidae ระบุว่า ค. เฟลิส เป็นหมัดที่พบได้บ่อยที่สุดของสุนัขในบ้านทั่วโลก [27] ค. เฟลิส ได้เก็บรวบรวมจากสัตว์ดุร้าย เช่น หนูพันธุ์ สุนัขจิ้งจอก หนู พังพอน และเม่น และข้อมูลนี้สรุปไว้ในตารางที่ 1 โดยทั่วไปแล้ว รายงานจำนวนมากยืนยันว่าแมวมักถูกรบกวนโดย ค. เฟลิส กว่าสุนัขความชุกของ ค. เฟลิส เป็นฤดูกาล แต่ปรากฏตลอดทั้งปี และหมัดตัวเมียจะเก็บบ่อยกว่าตัวผู้ C. canis เป็นที่แพร่หลายมากขึ้นในสุนัขในบางประเทศ เช่น กรีซ อิหร่าน และตุรกี

ตารางที่ 1

บทสรุปของ ค. เฟลิส โฮสต์อื่นที่ไม่ใช่แมวและสุนัข

สปีชีส์ (ชื่อภาษาพูด ชื่อวิทยาศาสตร์)ภูมิภาค/ประเทศความคิดเห็นข้อมูลอ้างอิงที่สำคัญ
เม่นแคระแอฟริกัน Ateleix albiventrisแทนซาเนียพยาธิภายนอกที่พบมากเป็นอันดับ 2[28]
หนูพันธุ์สามัญ ดิเดลฟิส มาซูเปียลิสเฟรนช์เกีย [29]
ตูดบ้าน Equus asinusอิสราเอลโรคโลหิตจางรุนแรง[30]
แกะบ้าน Ovis ariesอิสราเอล อิหร่าน เอธิโอเปียโรคผิวหนังภูมิแพ้ตามฤดูกาล[31,32,33]
กระต่ายหางฝ้ายตะวันออก ซิลวิลากัส ฟลอริเดียนัสสหรัฐในสวนสัตว์[34]
เม่นยุโรป Erinaceus europaeusเยอรมนีเม่น 7.9% ถูกรบกวน[35]
Gazellas ละมั่งละมั่งอิสราเอลในสวนสัตว์[36]
แพะ Capra aegagrus hircusEygpt อิหร่าน เอธิโอเปีย [32,33,37]
แมวทอง Catopuma temminckiiประเทศไทย [38]
สุนัขจิ้งจอกสีเทา Urocyon cinereoargenteusเม็กซิโก [39]
หมีกริซลี่ Ursus arctos horribilisสหรัฐในสวนสัตว์[34]
พังพอนน้อยที่สุด มุสเตล่า นิวาลิสEygptการศึกษาทางซีรั่ม[37]
หมาป่าแผงคอ Chrysocion brachyurusบราซิลในสวนสัตว์[40]
Margay Leopardus wiediiเปรูในสวนสัตว์[41]
กวางบึง บลาสโตเซอร์เซคัส ไดโคโตมัสบราซิลในสวนสัตว์[42]
หนูนอร์เวย์ รัตตัส นอร์เวจิคัสประเทศจีน Eygpt [37,43]
แรคคูน Procyon lotorเวสต์เวอร์จิเนีย เวอร์จิเนีย สหรัฐอเมริกา [44,45]
จิ้งจอกแดง สกุลวูลเปสเวอร์จิเนีย เซาท์แคโรไลนา สหรัฐอเมริกา [45,46]
หนูหลังคา รัตตัส รัตตัสEygpt [37]
Rüppel’s จิ้งจอก Vulpes rueppelliEygptการศึกษาทางซีรั่ม[37]
เสื้อคลุมของอเมริกาใต้ นาสัว นาสัวบราซิลป่าในเมือง[47]
สกั๊งค์ลาย โรคเมฟิติสคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา [48]
หนูพันธุ์ Viriginia Didelphis virginianaสหรัฐ [34,45,46,49]
ควาย Bubalus bulalisอินเดีย [50]

Linardi และ Santos [14] รายงานสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม 41 สายพันธุ์และนก 1 สายพันธุ์ในบราซิล

ในไนจีเรีย มีการตรวจแมว 200 ตัว โดย 13% มี ค. เฟลิส [51]. ในเมืองฮาวาสซา ประเทศเอธิโอเปีย มีอุบัติการณ์ปรสิตภายนอกในแมวและสุนัขสูง โดยมีแมว 67% และสุนัข 82.9% ที่ติดเชื้อ ค. เฟลิส [52]. ค. เฟลิส ไม่ธรรมดาในแอฟริกาใต้ แต่ถูกพรากจากสุนัขในโจฮันเนสเบิร์ก [26]

ในการสำรวจสุนัข 214 ตัว พบว่า 110 ตัว (51.4%) มีผลบวกต่อ IgE ในการต่อต้านหมัดในญี่ปุ่น ซึ่งบ่งชี้ว่าสุนัขเคยถูกรบกวนในคราวเดียว สุนัขในพื้นที่ภาคเหนือของญี่ปุ่นที่คิดว่าไม่มีหมัดก็มีโอกาสติดเชื้อได้ [53] การสำรวจสุนัขจรจัด 324 ตัวในอินเดียระบุว่า 24% ถูกรบกวน ค. เฟลิส ประกอบด้วย 10.4% [54] ในประเทศไทยเท่านั้น ค. เฟลิส ถูกพบในแมวในขณะที่ ค. orientis พบในสุนัข [55] แมวจรจัด (NS = 200) ในไทเปถูกตรวจสอบและ 82% ถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส [56]. การสำรวจสุนัข 83 ตัวจากสามภูมิภาคของอิหร่านส่งผลให้มีหมัด 407 ตัว โดย 67.5% เป็น ค. เฟลิส [57]. ในการศึกษาอื่นตามแนวพรมแดนอิรัก-อิหร่าน มีการสำรวจสุนัข 802 ตัวและแมว 50 ตัว โดยสุนัข 2.4% และแมว 65% ติดเชื้อ ค. เฟลิส [58]. มีสุนัขเพียง 2 จาก 126 ตัวในอิหร่านตะวันตกเฉียงใต้ที่ถูกรบกวน ค. เฟลิส [59]. จากหมัดที่เก็บจากสุนัขจรจัด 70 ตัวในภาคเหนือและภาคกลางของอิหร่าน 19.9% ​​เป็น ค. เฟลิส [60]. ในการศึกษาในอิสราเอล มีการตรวจสอบแมวจรจัด 340 ตัว โดย 54.7% ถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส. หมัดหายทุกเดือนด้วยจำนวนสูงสุดในฤดูใบไม้ร่วง [61]

ในออสเตรเลีย 98.8% ของหมัด 2,500 ตัวที่รวบรวมได้คือ ค. เฟลิส และ haplotype เดียวของ cox2 พบลำดับยีน [62] ในเกาะบอร์เนียว มีการตรวจสุนัข 195 ตัว และหมัด 1965 ตัวที่เก็บได้ 25.4% ค. เฟลิส, สิ่งที่เหลืออยู่ ค. orientis [63]. ค. เฟลิส รวบรวมจากทั้งแมวและสุนัขในกวม [64]

การสำรวจล่าสุดจำนวนมากได้ดำเนินการไปทั่วยุโรป การสำรวจปรสิตภายนอกและเอนโดปาราไซต์ของแมว 1519 ตัวจาก 7 ประเทศในยุโรป พบว่า 15.5% ของแมวที่นำส่งคลินิกสัตวแพทย์นั้นมีหมัดอยู่เต็มไปหมด ในแมวที่เป็นโรคโลหิตจาง 93.5% มีหมัดชุกชุมมาก [65] ทางตอนใต้ของโปแลนด์ มีแมลงปรสิต 225 ตัวที่เก็บจากสัตว์เลี้ยงเพียง 3 ตัว ค. เฟลิส [66]. เมื่อสำรวจสุนัขและแมวในสาธารณรัฐเช็ก 60% เป็น ค. เฟลิสเป็นของสากล cox1 แฮ็ปโลไทป์ พบฮาโพลไทป์นวนิยายทั้งในสาธารณรัฐเช็กและโรมาเนีย [67] จากการสำรวจสุนัข 1342 ตัวและแมว 1378 ตัว นำเสนอในคลินิกต่างๆ 22 แห่งในเซอร์เบีย พบว่า 79.2% ของหมัดเป็น ค. เฟลิส โดยพบมากที่สุดในแมวตั้งแต่เดือนกรกฎาคมถึงกันยายน [68] ในฮังการี มีการตรวจสอบสุนัข 2267 ตัว โดยสุนัข 115 ตัวถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส และแมว 23 จาก 100 ตัวที่ตรวจสอบถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส. หมัดพบมากจากสัตว์ในชนบทมากกว่าจากสัตว์ในเมือง [69] ในฮังการีตะวันตก 71% ของแมว 82 ตัวที่ตรวจมี ค. เฟลิส [70]. ในตุรกี มีการตรวจสุนัข 48 ตัว และหมัด 43.8% ถูกรบกวน ค. เฟลิส พบในสุนัข 4.2% โดยมีหมัดเฉลี่ย 5 ตัว/ตัว ไม่มีรูปแบบตามฤดูกาล [71] ในเมืองติรานา ประเทศแอลเบเนีย มีการตรวจสุนัข 128 ตัว และแมว 26 ตัว เพื่อหาปรสิตภายนอก โดยสุนัข 5% และแมว 100% ติดเชื้อ ค. เฟลิส. พบหมัดตลอดทั้งปี [72] ในการศึกษาอื่นจากติรานา มีการตรวจแมวบ้าน 131 ตัวสำหรับปรสิตภายนอก โดย 52% ถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส. ค. เฟลิส ถูกเก็บรวบรวมตลอดทั้งปีโดยมีการเก็บ 48.8% ในฤดูใบไม้ร่วงตั้งแต่เดือนกันยายนถึงพฤศจิกายน [73] คลินิกสี่แห่งในแอลเบเนียตรวจสอบสุนัขที่ลูกค้าเป็นเจ้าของ 602 ตัว และพบว่า 3.0% ถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส [74]. การสำรวจในเยอรมนีพบว่าสุนัข 5.1% และแมว 14.3% มีหมัด ของหมัดที่เก็บได้ 81.1% เป็น ค. เฟลิส และอัตราการแพร่ระบาดในเมืองกับชนบทไม่มีความแตกต่างกัน [75] การสำรวจอื่นในเยอรมนีพบว่า 71.1% ของสุนัขและ 83.5% ของแมวถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส. ความชุกที่เพิ่มขึ้นในช่วงทศวรรษที่ผ่านมาอาจเนื่องมาจากตัวเรือนที่มีการควบคุมอุณหภูมิ [35] ในฝรั่งเศส มีการตรวจสุนัข 392 ตัวที่ติดเชื้อหมัดและ 86.6% ของหมัดทั้งหมด ค. เฟลิส. ค. เฟลิส พบได้ทั่วฝรั่งเศสทั้งในร่มและกลางแจ้ง ของหมัดที่เก็บจากสุนัขที่อาศัยอยู่ตามระดับความสูง 𾐀 ม. เพียง 11.2% เท่านั้น ค. เฟลิส เทียบกับ 32.5% C. canis [76].

มีการสำรวจคลินิก 31 แห่งในสหราชอาณาจักรและตรวจสุนัข 2,653 ตัวและแมว 1508 ตัว ซึ่งแมว 21.1% และสุนัข 6.8% ถูกรบกวน ค. เฟลิส เป็นหมัดที่พบมากที่สุด 98.9% ในแมวและ 93.2% ในสุนัข [77] จาก 138 หมัดที่เก็บในสหราชอาณาจักรในฤดูใบไม้ร่วงและฤดูหนาว 96% เป็น ค. เฟลิส. หมัดแมวเพศเมียที่โตเต็มวัยยังคงมีไข่เติบโตเต็มที่ตลอดฤดูใบไม้ร่วงและฤดูหนาว [78]

ในประเทศเซอร์เบีย สุนัขจำนวน 1484 ตัวถูกนำตัวไปที่คลินิกจากหลายเมือง 26.3% ถูกรบกวนด้วยหมัด โดย 71.9% เป็น ค. เฟลิส. อัตราการแพร่ระบาดสูงสุดคือตั้งแต่เดือนมิถุนายนถึงตุลาคม [79] ในกรีซ 13.7% ของหมัดที่เก็บมาจากสุนัขคือ ค. เฟลิส, สิ่งที่เหลืออยู่ C. canis [80]. การสำรวจทางตอนใต้ของอิตาลีพบว่า ค. เฟลิส ใน 16.3% ของสุนัข 1376 ตัวที่ตรวจ [81] ตรวจพบหมัดได้ตลอดทั้งปี โดยจะพบมากที่สุดระหว่างเดือนมิถุนายนถึงตุลาคม ในการศึกษาอื่นในอิตาลี 80.3% ของหมัดที่เก็บได้จากสุนัข 73 ตัวและแมว 44 ตัว ค. เฟลิส [82]. จากจำนวนหมัด 3032 ตัวที่เก็บจากสุนัข 1,084 ตัว จาก 42 แห่งในสเปน 81.7% เป็น ค. เฟลิส. ค. เฟลิส มีมากที่สุดในช่วงต้นฤดูร้อนและปลายฤดูใบไม้ร่วง [83] ในการสำรวจอื่นจากสเปน คลินิกสัตวแพทย์ 77 แห่งรวบรวมหมัด 1938 ตัวจากแมว 217 ตัว ซึ่ง 98.4% เป็น ค. เฟลิส. อัตราการแพร่ระบาดลดลงในช่วงเดือนที่มีอากาศอบอุ่น และปริมาณหมัดโดยรวมมีความสัมพันธ์เชิงบวกกับปริมาณน้ำฝน [84] ในกรีซ มีการตรวจแมวจรจัด 341 ตัว และแมวจรจัด 24.3% ติดเชื้อ ค. เฟลิส. แมวที่มีขนยาว (Ϥ ซม. ยาว) มีปรสิตภายนอกมากกว่าแมวขนสั้นอย่างมีนัยสำคัญ โดยคิดเป็น 42.3% ของปรสิตภายนอก ค. เฟลิส [85]. จากการตรวจสุนัขจรจัด 242 ตัว พบว่ามีสุนัขจรจัด 46.2% ค. เฟลิส หรือ C. canis ในกรีซ [86].

ในอเมริกาเหนือ การสำรวจแมวป่า 200 ตัวจากตอนกลางของฟลอริดาตอนเหนือพบว่า 92.5% ของพวกมันถูกรบกวน ค. เฟลิส. จำนวนหมัดสูงสุดคือในเดือนมิถุนายนและกรกฎาคม (16.6�.3 หมัดต่อแมวหนึ่งตัว) และต่ำสุดตั้งแต่เดือนสิงหาคมถึงกันยายน (7.7 ถึง 8.4 หมัดต่อแมวหนึ่งตัว) [87] ค. เฟลิส ได้รับรายงานจากสุนัขในเซาท์แคโรไลนา [46] ในจอร์เจีย 2518 หมัดถูกรวบรวมจากสุนัข โดย 61% เป็น ค. เฟลิส. รวบรวมหมัดตัวเมียสามตัวสำหรับตัวผู้แต่ละคน หมัดส่วนใหญ่ถูกรวบรวมตั้งแต่เดือนสิงหาคมถึงตุลาคม [88] จากแมวที่เดินเตร่อิสระ 673 ตัวที่ตรวจในภาคกลางของสหรัฐฯ 71.6% มีหมัด โดย 97.2% เป็น ค. เฟลิส [89]. ค. เฟลิส เป็นหมัดสัตว์เลี้ยงทั่วไปและแพร่หลายในเวสต์เวอร์จิเนียและเวอร์จิเนีย พบหมัดในทุกเดือน โดยในเดือนมิถุนายน กันยายน และตุลาคม สูงสุดและเดือนเมษายนต่ำสุด [44,45] ในเม็กซิโก ประมาณ 30% ของสุนัข (1803) และแมว (517) ที่ตรวจสอบมีหมัด จากจำนวนหมัดที่เก็บได้ 4215 ตัว 81.1% เป็น ค. เฟลิส. ความชุกของหมัดไม่มีการเปลี่ยนแปลงตามฤดูกาล [45] ในทำนองเดียวกัน จาก 358 แมวที่รวมอยู่ในการศึกษาอื่น 53% ถูกรบกวนด้วยหมัด จาก 2985 หมัดที่เก็บได้ 89% เป็น ค. เฟลิส [90]. ในเมือง Aguasclientes ประเทศเม็กซิโก มีการตรวจสุนัข 863 ตัว และ 38% ของหมัด 629 ตัวที่เก็บได้ ค. เฟลิส มีความชุกสูงขึ้นในฤดูใบไม้ผลิและฤดูร้อน [91] บนเกาะเซนต์คิตส์ 26% ของแมวจรจัด 100 ตัวถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส [92]. หมัดเป็นพยาธิภายนอกที่พบมากที่สุดในบ้านในคอสตาริกา โดย 83% ของสุนัขถูกรบกวน ค. เฟลิส [93].

ในอเมริกาใต้ มีการสำรวจอย่างกว้างขวางที่สุดในบราซิล สำรวจสุนัขบ้านแปดสิบแปดตัวที่อาศัยอยู่นอกบ้านทุกเดือนเป็นเวลาหนึ่งปีเท่านั้น ค. เฟลิส ถูกรวบรวม ไม่มีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญระหว่างอุณหภูมิและดัชนีการรบกวน และมีความสัมพันธ์เชิงลบระหว่างดัชนีการระบาดและปริมาณน้ำฝน [94] ปาซและคณะ [94] สรุปว่าความแตกต่างตามฤดูกาลใน ค. เฟลิส น่าจะเป็นเพราะสภาพภูมิอากาศในภูมิภาคเฉพาะของบราซิล ในการศึกษาที่คล้ายกัน ได้ทำการสำรวจสุนัขจากฟาร์มแห่งหนึ่งในบราซิลเป็นเวลา 1 ปีและรวบรวมหมัดสองสายพันธุ์ ค. เฟลิส และ P. irritans. จำนวนหมัดแมวในสุนัขขนยาวมากกว่าสุนัขขนสั้นอย่างมีนัยสำคัญ [95] จากแมว 292 ตัวที่ส่งไปยังโปรแกรมทำหมัน/ทำหมัน มี 60% ที่ถูกรบกวนด้วย ค. เฟลิส [96]. ในชนบททางตะวันออกเฉียงเหนือของบราซิล สุนัข 18 จาก 29 ตัวถูกรบกวน ค. เฟลิส [97]. ในพื้นที่ชนบทสองแห่งของบราซิล สุนัขทั้งหมด 328 ตัวทำการตรวจ ค. เฟลิส พบในสุนัข 43.9 ถึง 87.3% ขึ้นอยู่กับท้องที่และฤดูกาลของปี [98] ในภาคตะวันออกเฉียงเหนือของบราซิล มีการตรวจสุนัขในเมือง 300 ตัวและสุนัขในชนบท 322 ตัว และสุนัขติดเชื้อ 23.2% ค. เฟลิส. สุนัขในชนบทถูกรบกวนมากกว่าสุนัขในเมือง [99] ในบราซิล, ค. เฟลิส เป็นหมัดที่พบมากที่สุดในสุนัข [100]

ในประเทศอื่น ๆ ในอเมริกาใต้ มีการสำรวจสุนัข 107 ตัวจากส่วนติดต่อระหว่างสัตว์ป่าและสัตว์ป่าในชิลีตอนกลางและรวบรวมหมัดต่อไปนี้: ค. เฟลิส (74.3%), C. canis (58.4%), Pulex sp. (11.8%) [101]. การศึกษาในชิลีตอนกลางแนะนำว่าสุนัขจิ้งจอกป่า (Pseudalopex griseus) และกริซอนน้อยกว่า (Galictus cuja) สามารถแบ่งปันหมัดและโรคที่อาจเกิดขึ้นกับสุนัขในบ้านได้ มีการตรวจสุนัข 50 ตัวใน Santiago, Concepción, และ Osorno, Chile และ 1,000 หมัดที่เก็บได้ในแต่ละเมือง ค. เฟลิส คิดเป็น 80.5, 38.4 และ 6.6% ตามลำดับ โอซอร์โนเป็นเขตชนบทมากกว่าเมืองซานติอาโก และอาจอธิบายความแตกต่างในองค์ประกอบของสปีชีส์ [102] ในโคลัมเบีย มีการสำรวจสุนัข 140 ตัวและแมว 30 ตัว และจากหมัด 3448 ตัวที่เก็บได้ 93.3% ค. เฟลิส [103]. ค. เฟลิส ได้รับรายงานจากเฟรนช์เกียนาเกี่ยวกับแมวและสุนัข [29]

ค. เฟลิส เป็นตัวป้อนฉวยโอกาสและได้รับการรวบรวมจากโฮสต์ดุร้ายที่หลากหลาย รายชื่อโฮสต์อื่นมีอยู่ในตารางที่ 1

2.2. ชีววิทยาและประวัติชีวิต

ผู้ใหญ่ ค. เฟลิส แสดงจังหวะ circadian โดยมีกิจกรรมสูงสุดเกิดขึ้นประมาณ 9 ชั่วโมงในระยะแสง [104] การผสมพันธุ์ไม่เคยเกิดขึ้นนอกโฮสต์ หมัดต้องกินอาหารอย่างต่อเนื่องเพื่อให้เกิดการผสมพันธุ์และการผสมเทียมสูงสุด การถ่ายโอนอสุจิและการผสมเทียมของเพศหญิงโดยเพศชายที่เลี้ยงด้วยเลือดจากเยื่อหุ้มเซลล์เท่ากับ 84 และ 45% ตามลำดับ ฮอร์โมนแอนะล็อกสำหรับเยาวชน (JHs), เมโธพรีน และไพริพรอกซีเฟน อาจควบคุมความสำเร็จในการผสมพันธุ์โดยทางอ้อมด้วยการกระตุ้นการถ่ายโอนตัวอสุจิ [105] เพศผู้ที่ได้รับสารละลายเกลือหรืออาหารที่ปราศจากโปรตีนไม่ได้ผสมเทียมกับตัวเมีย [106] การสัมผัสหมัดต่ออุณหภูมิร่างกายของโฮสต์และปริมาณการให้อาหารเป็นสองปัจจัยที่ส่งผลต่อการผสมเทียม [107] พฤติกรรมการผสมพันธุ์ของ ค. เฟลิส ได้อธิบายไว้อย่างละเอียด [108,109] เฉพาะผู้ชายที่ได้รับอาหารเท่านั้นที่พยายามจะผสมพันธุ์กับตัวเมียที่ไม่ได้รับอาหารหรือได้รับอาหาร การผสมพันธุ์ส่วนใหญ่เกิดขึ้นที่อุณหภูมิ 38ଌ ซึ่งเป็นอุณหภูมิร่างกายของแมวและสุนัข ที่น่าสนใจคือ สารสกัดคลอโรฟอร์ม:เมทานอลจากหญิงพรหมจารีดูเหมือนจะมีฟีโรโมนทางเพศ หญิง ค. เฟลิส แต่งงานกับผู้ชายหลายคน [109]

หมัดประมาณ 25% ที่เก็บมาจากขนของแมว ถูกคัดออกภายใน 5 นาที และเกือบทั้งหมดได้รับอาหารภายใน 1 ชั่วโมง ระยะเวลาให้อาหารเฉลี่ย 25 ​​และ 10 นาทีสำหรับหมัดตัวเมียและตัวผู้ ตามลำดับ [110] หมัดตัวเมียผลิตละอองอุจจาระแห้งมากกว่าตัวผู้อย่างมีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตาม หมัดตัวเต็มวัยตัวผู้และตัวเมียผลิตโปรตีนในปริมาณที่ใกล้เคียงกันในละอองอุจจาระของพวกมัน [111]

มีการรวบรวมหมัดที่ศีรษะและคอของแมวมากกว่าอย่างเห็นได้ชัดเมื่อเทียบกับลำตัวหน้าท้อง เก็บหมัดน้อยที่สุดที่ขาและหาง [56] เมื่อหมัดตัวเต็มวัยสร้างตัวบนโฮสต์แล้ว (48 ชั่วโมง) การเคลื่อนที่ไปยังโฮสต์ที่ไม่ติดเชื้อนั้นต่ำ (3.7%) [112] ประมาณ 33% ของหมัดดั้งเดิมไม่ถูกนับหลังจาก 72 ชั่วโมง การกำจัดหมัดจำนวนมากขึ้นโดยการดูแลจากแมวที่แพ้หมัดเมื่อเทียบกับแมวทั่วไป หมัดตัวเมียผลิตไข่ในแมวที่เป็นโรคผิวหนังอักเสบจากหมัด (FAD) น้อยกว่าหมัดในแมวปกติแม้ว่าการให้อาหารจะเหมือนกันก็ตาม ปัจจัยที่ไม่รู้จักบางอย่างอาจทำให้จำนวนไข่ที่ผลิตในแมว FAD ลดลง [113] ประสิทธิภาพของการดูแลโดยแมวเพื่อกำจัดหมัดแมวนั้นแตกต่างกันไปจาก 4.1 ถึง 17.6% ของภาระหมัดในแต่ละวัน อายุขัยเฉลี่ยของหมัดบนโฮสต์คือ 7.8 วัน และตัวเมียวางไข่ 38.4 ฟองต่อวัน [114] เมื่อหมัดไปถึงเจ้าบ้านแล้ว การดูแลเจ้าบ้านก็ดูเหมือนจะเป็นปัจจัยสำคัญในการตาย

การทดสอบ PCR แบบมัลติเพล็กซ์ได้รับการพัฒนาขึ้นเพื่อตรวจหาอาหารในเลือดของหมัดจากคน แมว ไก่ และหนู มนุษย์และแมวเป็นแหล่งเลือดหลักสำหรับ ค. ฉ. Strongylus [115]. ความก้าวหน้าอีกประการหนึ่งโดยใช้ PCR แบบเรียลไทม์คือความสามารถในการตรวจจับ DNA ของมนุษย์ หนู และแพะใน ค. เฟลิส ให้อาหารเทียมนานถึง 72 ชั่วโมงหลังให้อาหาร [116] เทคนิค PCR แบบใหม่ได้รับการพัฒนาขึ้นซึ่งมีความละเอียดอ่อนและเฉพาะเจาะจงสำหรับเลือดที่หมัดแมวกินเข้าไป [117] เพิ่มการแสดงออกของยีนในระหว่างการให้เลือดใน ค. เฟลิส ถูกตรวจสอบและพบยีนจำนวนหนึ่งที่ถูกกระตุ้นระหว่างการให้อาหาร โปรตีนจากยีนเหล่านี้อาจมีความสำคัญในการย่อยอาหาร การทำงานของเซลล์ และการป้องกันระหว่างการให้อาหาร นี่อาจเป็นการเปิดช่องทางใหม่สำหรับการควบคุม [118] ส่วนประกอบของน้ำลาย sialome ของ ค. เฟลิส รวมถึงพอลิเปปไทด์ขนาดเล็กจำนวนมากที่ไม่ทราบหน้าที่ ส่วนของเซียโลมของ ค. เฟลิส คล้ายกับของ X. cheopis [119].

ได้มีการตรวจสอบพฤติกรรมการกระโดดของทั้ง 2 อย่างแล้วว่า C. canis และ ค. เฟลิส ได้รับการดัดแปลงอย่างมากสำหรับการรักษาความปลอดภัยโฮสต์ที่เคลื่อนย้ายได้ขนาดใหญ่ ค. เฟลิส มีความเร็วในการกระโดดที่เร็วกว่า (เฉลี่ย 3.6 ม./วินาที) มากกว่า X. cheopis (เฉลี่ย 1.4 ม./วินาที) [120] ความสูงเฉลี่ยของการกระโดดสำหรับ C. canis คือ 15.5 ซม. และ 13.2 ซม. สำหรับ ค. เฟลิส, กระโดดสูงสุด 25 และ 17 ซม. สำหรับ C. canis และ เฟลิสตามลำดับ ความยาวเฉลี่ยของการกระโดดสำหรับ C. canis และ เฟลิส คือ 30.4 และ 19.9 ซม. ตามลำดับ [121]

เมื่อแมวที่มีหมัดระบาดอยู่ในห้องปูพรม ไข่หมัดและตัวอ่อนจะสะสมอยู่รอบๆ ที่ให้อาหารและที่พักของสัตว์เลี้ยง [122] Linardi และคณะ [123] รายงานว่าเลือดจากสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและนก 9 ชนิดมีสารอาหารไม่เพียงพอ โดยมีเพียง 33% ของตัวอ่อนดักแด้ ผู้ที่อยู่ในช่วงเริ่มต้นขึ้นอยู่กับส่วนประกอบอาหารที่จำเป็นและใช้เวลามากขึ้นในอาหารเหล่านั้น ตัวอ่อนใช้เวลาส่วนใหญ่ไปกับเลือดอุจจาระและไข่หมัดของตัวเต็มวัย [124] เลือดวัวที่พ่นให้แห้งเป็นอาหารห้องปฏิบัติการที่น่าพอใจสำหรับตัวอ่อนหมัดแมว [125] มีเพียง 13.3% ของตัวอ่อนที่พัฒนาสู่ตัวเต็มวัยเมื่อให้อาหารมูลหมัด เทียบกับ 90% เมื่อเลี้ยงด้วยมูลหมัดและไข่หมัดที่ไม่มีชีวิต อย่างไรก็ตาม ตัวอ่อนไม่ได้พัฒนาบนไข่หมัดเพียงอย่างเดียว [126] ทั้งหมด ค. เฟลิส ตัวอ่อนที่กินอุจจาระของผู้ใหญ่และไข่หมัดแมวแช่แข็งพัฒนาเป็นผู้ใหญ่ในขณะที่เพียง 6.6% เท่านั้นที่เลี้ยงด้วยเลือดจากอุจจาระที่พัฒนาเป็นผู้ใหญ่ ตัวอ่อนกินไข่หมัดจนโตเต็มวัยแล้ว 㸠 นี่อาจเป็นปัจจัยควบคุมประชากร [127] มีความสัมพันธ์เชิงบวกโดยตรงระหว่างการบริโภคยีสต์และการเกิดรังไหม [128] อินสตาร์ที่ 3 เท่านั้นที่กินไข่ในขณะที่อินสตาร์ทั้งหมดกินยีสต์ ดักแด้เปล่าถูกกินโดยตัวอ่อน instar ที่ 3 ในขณะที่ดักแด้ในรังไหมได้รับการปกป้องจากการปล้นสะดม วัสดุพิมพ์เช่นพรมช่วยป้องกันตัวอ่อนจากการกินเนื้อคนและเพิ่มโอกาสในการพัฒนาไปสู่ผู้ใหญ่ได้สำเร็จ นอกจากสารอาหารจำเพาะแล้ว ความชื้นสัมพัทธ์ในสิ่งแวดล้อมยังมีความสำคัญต่อการพัฒนาอีกด้วย ตัวอ่อนดูดน้ำอย่างแข็งขันเมื่อ RH > 53% ดักแด้ล่วงหน้าดูดซับน้ำอย่างแข็งขันเมื่อ RH อยู่ระหว่าง 75 ถึง 93% ดักแด้และผู้ใหญ่ไม่กระตือรือร้นที่จะรับน้ำจากชั้นบรรยากาศ [129]

ตัวอ่อนรอดชีวิตกลางแจ้งในฟลอริดาตอนกลางตอนเหนือตลอดทั้งปี ตั้งแต่เดือนกันยายนถึงพฤศจิกายนการอยู่รอดสูงถึง 84.6% ในเดือนมิถุนายนและกรกฎาคม ไข่จะเติบโตเป็นผู้ใหญ่ใน 20� วัน ในขณะที่ในฤดูหนาวจะใช้เวลา 36� วัน ระยะที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะรอดจากน้ำค้างแข็งในที่อยู่อาศัยขนาดเล็กที่ได้รับการคุ้มครอง [130] ตัวผู้และดักแด้ตัวผู้จะพัฒนาช้ากว่าตัวเมียประมาณ 20% [130,131] ที่ 15.5 & x 000b0C ผู้ใหญ่บางคนโผล่ออกมาช้าที่สุด 155 วันหลังจากการวางไข่ [131] แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงความสำคัญของดักแด้และระยะโตเต็มวัยในการรอดชีวิตจากสภาวะที่ไม่เอื้ออำนวย

ในช่วงหลายปีที่ผ่านมา ผู้ปฏิบัติงาน IPM มักให้ความสนใจในการพัฒนาแบบจำลองที่อาจคาดการณ์การเริ่มต้นฤดูหมัด แบบจำลองอุตุนิยมวิทยาได้รับการพัฒนาขึ้นเพื่อจัดทำดัชนีกิจกรรมรายสัปดาห์และดัชนีกิจกรรมสะสมในช่วง 12 สัปดาห์ เฉพาะกิจกรรมกลางแจ้งของหมัดเท่านั้นที่นำมาพิจารณาในการพัฒนาแบบจำลอง [132] การดูแลสุนัขในบ้านหรือวัวควายเพิ่มความชุกของหมัดแมวที่ถูกจับบนกระดาษเหนียวบนพื้นของครัวเรือนในมณฑลยูนนาน ประเทศจีน และส่งผลต่อโมเดลของพวกมัน [133]

ค. เฟลิส เป็นที่ทราบกันดีว่ามีเอนโดซิมบิออนต์จำนวนมาก แต่บทบาทของพวกมันยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด ในประเทศออสเตรเลีย ค. เฟลิส มีความหลากหลายของแบคทีเรียน้อยกว่าชาวพื้นเมือง ตัวตุ่น สายพันธุ์หมัด [67]. ทั้งสองสายพันธุ์ถูกครอบงำโดย endosymiont Wolbachia. Wolbachia แตกต่างกันไปตามแต่ละชนิดของหมัดและไม่ทราบความหมายในทางปฏิบัติ [134] เกรการีนในลำไส้ Steinima ctenocephaliไม่ส่งผลต่ออัตราการเกิดหรือการอยู่รอดของหมัด ตัวอ่อนของหมัดที่มีขี้กบพัฒนาเร็วกว่าตัวที่ไม่มีพวกมัน [135] ทริปปอนโซมาติด Leptomonas ctenocephali ถูกพบในทางเดินอาหารของหมัดแมวที่โตเต็มวัย แต่ยังไม่ทราบความสามารถในการทำให้เกิดโรคของหมัดหรือตัวโฮสต์ [136]


ลายเซ็นจีโนมของการปรับตัวบรรจบกับสภาพแวดล้อมอัลไพน์ในสามสายพันธุ์ Brassicaceae

มีการพูดคุยกันมานานแล้วว่าสายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องพัฒนากลไกทางพันธุกรรมที่คล้ายคลึงกันเพื่อปรับให้เข้ากับสภาพแวดล้อมที่คล้ายคลึงกันในระดับใด การศึกษาส่วนใหญ่ที่บันทึกการบรรจบกันดังกล่าวได้ใช้สายเลือดที่แตกต่างกันภายในสปีชีส์หรือสำรวจเพียงบางส่วนของจีโนมเท่านั้น ที่นี่ เราตรวจสอบว่าชุดของยีน orthologous ที่คล้ายคลึงกันหรือต่างกันเกี่ยวข้องกับการปรับตัวทางพันธุกรรมของประชากรตามธรรมชาติของพืชสามชนิดที่เกี่ยวข้องกันกับการไล่ระดับสิ่งแวดล้อมที่คล้ายคลึงกันในเทือกเขาแอลป์หรือไม่ เราใช้การจัดลำดับประชากรแบบรวมกลุ่มทั้งจีโนมเพื่อศึกษาการแปรผันของ SNP ทั่วทั้งจีโนมในประชากรตามธรรมชาติ 18 กลุ่มของ Brassicaceae สามชนิด (Arabis alpina, Arabidopsis halleri และ Cardamine resedifolia) จากเทือกเขาแอลป์สวิส ขั้นแรก เราเดอโนโวได้รวบรวมจีโนมอ้างอิงฉบับร่างสำหรับทั้งสามสปีชีส์ จากนั้นเราทำการวิเคราะห์จีโนมประชากรและภูมิทัศน์ด้วย

3 ล้าน SNPs ต่อสปีชีส์เพื่อค้นหาลายเซ็นจีโนมที่ใช้ร่วมกันของการคัดเลือกและการปรับตัวเพื่อตอบสนองต่อการไล่ระดับสิ่งแวดล้อมที่คล้ายคลึงกันซึ่งกระทำกับสปีชีส์เหล่านี้ พบยีนที่มีลายเซ็นของการปรับตัวแบบบรรจบกันในจำนวนที่สูงกว่าที่คาดโดยบังเอิญอย่างมีนัยสำคัญ คู่สปีชีส์ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดที่สุดแสดงให้เห็นการเป็นตัวแทนมากเกินไปของลายเซ็นการปรับตัวที่ใช้ร่วมกัน ยิ่งไปกว่านั้น ยีนที่ระบุของการปรับตัวแบบบรรจบกันนั้นได้รับการเสริมสมรรถนะสำหรับการกลายพันธุ์ที่ไม่มีความหมายเหมือนกัน ซึ่งชี้ให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องเชิงหน้าที่ของยีนเหล่านี้ แม้ว่ายีนของผู้สมัครที่ถูกระบุจำนวนมากจะมีฟังก์ชันที่ไม่รู้จักหรืออธิบายได้ไม่ดีมาจนถึงบัดนี้โดยอิงจากการเปรียบเทียบกับ Arabidopsis thaliana เราสรุปได้ว่าการปรับตัวให้เข้ากับสภาพแวดล้อมอัลไพน์ที่ต่างกันในสปีชีส์ที่เกี่ยวข้องนั้นส่วนหนึ่งขับเคลื่อนโดยวิวัฒนาการแบบบรรจบกัน แต่ลายเซ็นจีโนมส่วนใหญ่ของการปรับตัวยังคงจำเพาะต่อสปีชีส์

คำสำคัญ: สภาพแวดล้อมอัลไพน์ การปรับตัว การรวมกลุ่มของจีโนม สมาคมสิ่งแวดล้อม การปรับตัวของตระกูล Brassicaceae การสแกนจีโนม

© 2020 บริษัท จอห์น ไวลีย์ แอนด์ ซันส์ จำกัด

ตัวเลข

ระบบการศึกษา (ก) สามสายพันธุ์ศึกษาจากตระกูล Brassicaceae จากซ้าย…

ลายเซ็นที่ใช้ร่วมกันของการปรับตัวใน...

ลายเซ็นที่ใช้ร่วมกันของการปรับตัวในยีนผิดปกติของ Bayescan แสดงเป็นจำนวน…

ลายเซ็นที่ใช้ร่วมกันของการปรับตัวใน...

ลายเซ็นที่ใช้ร่วมกันของการปรับตัวในยีนที่เกี่ยวข้องกับปัจจัยด้านสิ่งแวดล้อม สำหรับแต่ละสิ่งแวดล้อม...


3 วิธี

3.1 หนู

หนูทุกตัวที่ใช้ในการทดลองได้รับการเพาะพันธุ์ที่ Australian BioResources (Moss Vale, NSW, Australia) และจัดขึ้นที่สถาบันวิจัยทางการแพทย์ Garvan ในสภาพแวดล้อมที่ปราศจากเชื้อโรค คณะกรรมการจริยธรรมของสัตว์ Garvan อนุมัติระเบียบวิธีและขั้นตอนของหนูทั้งหมด

หนูเมาส์ C57BL/6 (WT) ถูกซื้อมาจากทรัพยากรชีวภาพของออสเตรเลีย เพื่อสร้าง ลาบา −/− หนูเมาส์ RNA ไกด์เดี่ยวที่มีลำดับ 5′-TTAACTGAGTTGCGGTCACA TGG -3′ (PAM ที่ขีดเส้นใต้) ถูกฉีดไมโครร่วมกับ Cas9 mRNA เข้าไปใน C57BL/6 ไซโกต หนูผู้ก่อตั้งสี่ตัวที่เป็นผลลัพธ์นั้นเป็นโฮโมไซกัสสำหรับการลบ 8 bp เพื่อกำจัด Chr3:86445 392–86 445 399 (สร้าง GRCm38) ใน exon 37 ของอัลลีล LRBA

HyHEL10-ดัดแปลงพันธุกรรม (SWสวัสดี) หนูได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้แล้ว 45 หนูเหล่านี้ถือ V . สำเนาเดียวชมบริเวณแปรผันของสายโซ่หนักที่แปรผันได้ 10 อันที่ต่อต้าน HEL ซึ่งตั้งเป้าหมายที่อัลลีล IgH ที่เกิดภายใน บวกกับสำเนา V หลายชุดชมยีนสายเบาต้าน HEL 10-κ SWสวัสดี หนูเมาส์ถูกคงรักษาไว้บน CD45.1 congenic (Ptprc a/a ) พื้นหลัง C57BL6 สำหรับการทดลองที่SWสวัสดี เซลล์ถูกถ่ายโอนไปยังหนูที่ขาด LRBA, SWสวัสดี หนูถูกข้ามด้วย Rag1-น็อคเอาท์หนู 46 ตัวเพื่อป้องกันภายในร่างกาย อิก หรือ อิ๊กก การจัดเรียงยีนใหม่ เพื่อให้เซลล์ B ที่กำลังพัฒนาทั้งหมดแสดง HyHEL10 สิ่งนี้ทำให้มั่นใจได้ว่าไม่มี lrba +/+ ทีเซลล์ถูกถ่ายโอนไปในหนูเมาส์ที่ขาด LRBA สำหรับการทดลองเหล่านี้

นอกจากนี้ SWสวัสดี หนูถูกข้ามด้วย lrba −/− หนูที่จะสร้างเซลล์ B ที่แปลงพันธุ์ HyHEL10 ขาด ลาบา.

สำหรับการแทรกแซงการทดลองทั้งหมด สัตว์ของทั้งสองเพศถูกใช้ในแต่ละกลุ่มการทดลองและจับคู่กับจำนวนตัวผู้และตัวเมียในกลุ่มทดสอบและกลุ่มควบคุม สัตว์ได้รับการยกเว้นหากก่อนการคัดเลือกพบว่ามีความผิดปกติทางคลินิกในการตรวจร่างกายตามปกติ

3.2 ไคเมอราของไขกระดูกและการสร้างภูมิคุ้มกันโรค SRBC

ผู้รับ C57BL/6 Rag1 −/− หนูอายุ 8–12 สัปดาห์ได้รับการฉายรังสีด้วย 425 cGy โดยใช้เครื่องฉายรังสีชีวภาพ X-RAD 320 (เอ็กซ์เรย์ที่แม่นยำ, North Branford, CT, USA) ดูดไขกระดูกของผู้บริจาคจากกระดูกโคนขา กระดูกต้นขา และกระดูกหน้าแข้งลงในอาหารเลี้ยงเชื้อบีเซลล์ที่ประกอบด้วย RPMI (Gibco, Carlsbad, CA, USA) ด้วยซีรั่มลูกวัวในครรภ์ที่ไม่กระตุ้นด้วยความร้อน 10% (Gibco), 2 มล. -กลูตามีน และ 100 U/ml เพนิซิลลิน สื่อ RPMI (Gibco) ที่ 15 ชั่วโมงหลังจากการฉายรังสี หนูผู้รับถูกปลูกถ่ายด้วยการฉีดเข้าเส้นเลือดดำของเซลล์ไขกระดูก 5-10 × 10 6 เซลล์ ซึ่งประกอบด้วยส่วนผสมของ 50% จากหนูเมาส์ C57BL/6 พิการแต่กำเนิด CD45.1 และ 50% จาก C57BL6 (CD45.2) หนูที่เป็นอย่างใดอย่างหนึ่ง ลาบา −/− หรือ ลาบา +/+ .

หนูเมาส์ที่ไม่ได้รับการจัดการอายุ 8 สัปดาห์ และไคเมราจากไขกระดูก 8 สัปดาห์หลังการปลูกถ่ายไขกระดูก ได้รับภูมิคุ้มกันด้วย SRBCs 2 × 10 8 ที่ให้ทางหลอดเลือดดำ

3.3 โปรตีน HEL รีคอมบิแนนท์

Recombinant HEL 3X ถูกสร้างเป็นโปรตีนที่หลั่งใน พิเชีย ปาสโตริส ยีสต์ (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) และถูกทำให้บริสุทธิ์จาก supernatants ของวัฒนธรรมโดย ion exchange chromatography ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โปรตีน 26, 27, 45 ถูกเก็บไว้ในน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟตที่ 1–2.5 มก. มล. -1 ที่ −80 °C ก่อนใช้งาน ตัวอย่างถูกละลายและเก็บไว้ที่ 4 °C นานสูงสุด 8 เดือน เมื่อละลายแล้ว ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดหาโดยสเปกโตรโฟโตเมตรีที่ 280 นาโนเมตร

3.4 การผันและการถ่ายโอน SRBC

โปรตีน HEL ถูกแยกเกลือลงในบัฟเฟอร์ Conjugation (น้ำกลั่นที่มี 0.35 m d -mannitol (Sigma, St Louis, MO, USA) และ 0.01 m โซเดียมคลอไรด์ (Sigma)) สำหรับกระบวนการนี้ คอลัมน์ PD-10 (Amersham, Piscataway, NJ, USA) ถูกปรับสมดุลด้วยบัฟเฟอร์ Conjugation 30 มล. โหลดโปรตีนหนึ่งร้อยไมโครกรัมลงบนแต่ละคอลัมน์และผลักผ่านคอลัมน์โดยใช้บัฟเฟอร์คอนจูเกชัน 2.5 มล. สำหรับการชะของโปรตีน 3.5 มล. Conjugation buffer ถูกเติมและโปรตีน HEL ถูกรวบรวมเป็นเศษส่วนในปริมาตรต่อไปนี้: 250, 1000, 250, 250 และ 250 ไมโครลิตร ความเข้มข้นของโปรตีนของแต่ละส่วนถูกกำหนดโดยสเปกโตรโฟโตเมตรี

สำหรับการคอนจูเกต SRBCs ถูกล้างในน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 30 มล. ต่อ 6–8 × 10 9 เซลล์ และหนึ่งครั้งในบัฟเฟอร์คอนจูเกต จากนั้น SRBCs ถูกแขวนลอยใหม่ในปริมาตรสุดท้ายของบัฟเฟอร์คอนจูเกต 1000 ไมโครลิตรในหลอดเหยี่ยวนกเขาขนาด 50 มล. ที่มี HEL 3X 10 ไมโครกรัมมิลลิลิตร -1 สารละลายถูกผสมบนแท่นโยกบนน้ำแข็งเป็นเวลา 10 นาที หนึ่งร้อยไมโครลิตร 100 มก. มล. −1 NS-(3-ไดเมทิลอะมิโนโพรพิล)-NSจากนั้นเติม -เอทิลคาร์โบไดไมด์ ไฮโดรคลอไรด์ (ซิกมา) และสารละลายถูกผสมต่อไปอีก 30 นาทีบนน้ำแข็ง การยืนยันการคอนจูเกตที่ประสบความสำเร็จดำเนินการโดยการวิเคราะห์โฟลว์ไซโตเมตริกของ SRBC โดยใช้แอนติบอดี HyHEL9 ที่คอนจูเกตของ AlexaFluor 647 (ที่สร้างขึ้นภายในบริษัท)

การถ่ายโอนทางหลอดเลือดดำของ 3 × 10 4 SWสวัสดี B เซลล์ต่อเมาส์ของผู้รับพร้อมกับ 2 × 10 8 HEL 3X SRBC ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ 26

3.5 โลหิตวิทยาและโฟลว์ไซโตเมทรี

เซลล์เม็ดเลือดแดงและจำนวนเกล็ดเลือดถูกกำหนดในเลือดที่เก็บจากหลอดเลือดดำส่วนหางไปยังหลอด EDTA (Sarstedt, North Rhine-Westphalia, Nümbrecht, Germany) และวิเคราะห์ด้วยเครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยาอัตโนมัติ Sysmex XT-2000iV เมืองโกเบ จังหวัดเฮียวโงะ ประเทศญี่ปุ่น

On the day of harvest organs were collected into B-cell medium, cell suspensions passed through a 70 μm cell strainer (Falcon, Corning, NY, USA). Fc receptors were blocked with unlabelled anti-CD16/32 (eBioscience, San Diego, CA, USA) before staining. To detect HEL 3X -binding cells, cells were stained with 200 ng ml −1 HEL 3X , followed by AlexaFluor 647-conjugated HyHEL9.

Anti-IgG1-FITC (BD Pharminigen, San Diego, CA, USA) stains were followed by 5% mouse serum before staining for other surface molecules. CD4-BV786 (BD Pharminigen), CD8-APCCy7 (BD Pharminigen), CD62L-PerCPCy5.5 (BD Pharminigen) CD44-FITC (BD Pharminigen) and CD25-PE (BD Pharminigen) were used as surface stains. For the intracellular stains, CTLA-4-APC (eBioscience) and FOXP3-EF450 (eBioscience) cells were first permeabilised using FOXP3 Staining Permeabilisation Kit (eBioscience) according to the manufacturer's instructions. Cells were filtered using 35 μm filter round-bottom FACS tubes (BD Pharminigen) immediately before data acquisition on an LSR II analyser (BD Pharminigen).

Cytometer files were analysed with the FlowJo Software (FlowJo LLC, Ashland, OR, USA).

3.6 Single-cell FACS sorting

Cell suspensions were prepared and GC B cells were identified using flow cytometry. Single-cell sorting into 96-well plates (Thermo Fisher Scientific, Boston, MA, USA) was performed on the FACSAria or FACSAriaIII (BD Pharminigen). B cells from each mouse were analysed individually to ensure that over-representation of one particular clone did not affect the mutation analysis. NS VDJชม exon of the Hy10 heavy-chain gene was amplified from genomic DNA by PCR, sequenced and analysed as described previously. 27

3.7 Enzyme-linked immunosorbent assay

High-binding plates (Corning, NY, USA) were coated with the indicated Ig isotypes at 5 μg ml −1 (IgG2b (BD Pharminigen), clone: R9-91 IgA (BD Pharminigen), clone: C10-3 IgG1 (BD Pharminigen), clone: A85-1 IgM (BD Pharminigen), clone: 11/41 IgG3 (BD Pharminigen), clone: R2-38 IgG2a(b) (BD Pharminigen), clone: R11-89 IgE (BD Pharminigen), clone: R35-72). Bound serum antibody was quantified using Igκ (BD Pharminigen). Antibody levels were quantified against isotype-specific standards (IgG2b BD, IgA BD, IgG1 BD, IgM BD, IgG3 BD, IgG2a(b) (Southern Biotech, Birmingham, AL, USA) and IgE (BioLegend, San Diego, CA, USA)).

3.8 Viral infection

Mice were infected intravenously with 2 × 10 6 plaque-forming units of LCMV clone 13. T-cell stimulation with LCMV peptide, tetramer staining, surface staining and intracellular cytokine staining were performed as described previously. 47 , 48 , 49 MHC I LCMV tetramers were purchased from the Biomolecular Resource Facility, JCSMR, ANU, ACT, Australia, while the MHC II LCMV GP66–77 tetramer was obtained from the NIH Tetramer Core Facility (Emory University, Atlanta, GA, USA).

3.9 Statistical analysis

GraphPad Prism 6 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA) was used for data analysis. When the data were normally distributed, two-tailed Student's NS-test was performed for analysis. Welch's correction was used if variances were not equal. For all tests NS<0.05 was considered as being statistically significant. In all graphs presented error bars indicate mean and standard distribution. *NS<0.05, **NS<0.01, ***NS<0.001 and ****NS<0.0001.

3.10 ACKNOWLEDGMENTS

We thank the Garvan Institute ABR, GMG and Flow Cytometry facilities for expert animal husbandry, genotyping and cell sorting. This work was supported by NHMRC Project Grant 1108800, NHMRC Program Grants 1016953 and 1113904, NIH Grant U19 AI100627 and NHMRC Fellowship 1081858, and by the Ritchie Family Foundation.

ผู้เขียนประกาศไม่มีความขัดแย้งทางผลประโยชน์

LRBA deficiency decreases CTLA-4 on CD4 effector/memory and Tregs. Flow cytometric analysis of spleen cells from age- and sex-matched Lrba −/− (blue) or WT (red) mice at 6 (NS=6) or 26 weeks (NS=4) of age. (NS) CTLA-4 expression on CD4 memory/effector T cells. (NS) Representative flow cytometry plots of permeabilised CD4 + FOXP3 − cells from 6-week-old mice showing % CTLA-4 + CD44 hi cells and histograms of CTLA-4 in the CD4 + CD44 hi CTLA-4 + population in 6- and 26-week- old mice. Lrba +/− are indicated in pale blue. Graphs show (NS) the number of CTLA-4 + CD4 + CD44 hi FOXP3 − cells and () CTLA-4 mean fluorescence intensity (MFI) in individual mice and arithmetic mean for each genotype and age group. (NSNS) CTLA-4 expression on CD4 + Treg cells. (NS) Representative plots of permeabilised CD4 + cells showing the % FOXP3 + Treg cells in 6-week-old mice. Representative Treg histograms and MFI for: (อี) CTLA-4 (NS) FOXP3 (NS) CD25. Statistical analysis was carried out using NS-test: *NS<0.05 **NS<0.01 ***NS<0.001 ****NS<0.0001. Data are representative of one experiment.

Absence of immune dysregulation disease in LRBA-deficient mice. (NSNS) Analysis of sex-matched WT (red) and Lrba −/− (blue) mice at 6 weeks of age, showing individual results and means for each group. (NS) Flow cytometric analysis of spleen, showing the numbers of: (NS) CD4 + or CD8 + T-cell subsets of central memory (CD62L + CD44 + ), effector memory (CD62L − CD44 + ), naïve (CD62L + CD44 − ) or Tregs (CD4 + FOXP3 + ). (NS) B cells (B220 + ) and subsets of transitional 1 (T1, B220 + CD93 + CD23 − ), transitional 2 and 3 (B220 + CD93 + CD23 + ), marginal zone (B220 + CD21 + CD23 − ), mature follicular (B220 + CD93 − CD23 + ) and B-1 (B220 − CD19 + ) B cells per spleen. () neutrophils (B220 − MHC II − Ly6G + CD11b + ) and NK lymphocytes (B220 − CD8 − MHC II − NK1.1 + ). (NS) CD86 mean fluorescence intensity (MFI) on marginal zone and follicular B cells. (อี) Flow cytometric analysis of bone marrow, showing % of lymphocytes that are pro-B cells (B220 + CD43 int ), pre-B cells (B220 + CD43 − IgM − ), immature B cells (B220 int CD43 − IgM + IgD − ), transitional B cells (B220 hi CD43 − IgM + CD24 + IgD lo ) and mature B cells (B220 hi CD43 − IgM + CD24 − IgD + ). (NS) Flow cytometric analysis of thymus, showing number of CD8 − CD4 − double-negative (DN), double-positive (DP), CD8 + or CD4 + single-positive, or CD4 + FoxP3 + Treg cells. NS=6 per group. Data are representative of one experiment. (NS) Titres of IgG2b, IgA, IgG1, IgM, IgG3 Ig2Ga(b) and IgE antibodies in the serum of unimmunised mice, determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). NS=10 per group. Representative of two comparable experiments. Statistical analysis was carried out using NS-test: **NS<0.01.

Decreased peritoneal B-1 B cells in LRBA-deficient mice. Flow cytometric analysis of peritoneal cavity lymphocytes from sex-matched WT (red) and Lrba −/− (blue) mice at 6 (NS=6) or 26 (NS=4) weeks of age, showing individual results and means for each group. (NS และ NS) Percentage of lymphocytes that are T cells (B220 − IgM − CD23 − CD5 + ), B-2 cells (CD19 − B220 hi ), B-1 cells (CD19 + B220 lo IgM + CD23 − ), B-1a cells (CD19 + B220 lo IgM + CD23 − CD5 + ) and B-1b cells (CD19 + B220 lo IgM + CD23 − CD5 − ). ( และ NS) Representative flow cytometric plots showing gating IgM, CD23, B220 and CD19 staining for B-1 and B-2 cells and representative CD5 histograms of B-1 cells showing gates on CD5+ B-1a and CD5- B-1b cells from mice at 6 () and 26 (NS) weeks of age. Statistical analysis was carried out using NS-test: *NS<0.05 **NS<0.01. Data are representative of one experiment.

Cell-autonomous loss of CTLA-4 on LRBA-deficient T cells in bone marrow chimeras. Irradiated Rag1 −/− recipient mice were transplanted with a bone marrow mixture comprising 50% CD45.1 + Lrba +/+ cells and 50% CD45.2 + cells that were either Lrba −/− หรือ Lrba +/+ (WT). One hundred percent CD45.2 + Lrba −/− หรือ Lrba +/+ (WT) marrow was transplanted into a parallel group of Rag1 −/− recipients. At 8 weeks after transplantation, the chimeric mice were immunised with SRBCs three times 3 days apart and blood was analysed by flow cytometry 62 days after the first immunisation. Lines connect paired values for CD45.1 and CD45.2 cells in individual chimeric mice. (NS) Percentage of CD45.2 + Lrba −/− (blue) or Lrba +/+ (WT, red) cells among the indicated lymphocyte subsets in individual mixed chimeric mice and arithmetic means: B cells (B220 + ), T cells (CD3 + ), CD4 + T cells, effector CD4 + T cells (CD25 + , CD44 hi ), CD8 + T cells, effector CD8 + T cells (CD25 + , CD44 hi ) and Tregs (CD4 + FOXP3 + ). (NSอี) Analysis of CD4 + FOXP3 − cells. (NS) Representative plots of intracellular CTLA-4 and CD44 gated on CD45.1 + (WT) or CD45.2 + (WT or Lrba −/− ) CD4 + FOXP3 − cells. (อี) Analysis of CTLA4 + CD44 + CD4 + FOXP3 − cells, showing: () percentage among the CD45.1 + or CD45.2 + subsets of total T cells (NS) representative CTLA-4 histograms (อี) CTLA-4 MFI values. Dotted lines represent CD45.2+ (Lrba +/+ or Lrba −/− ) cells in mixed chimeras solid lines represent equivalent cells in 100% Lrba +/+ or Lrba −/− chimeras. (NSNS) Analysis of CD4 + FOXP3 + cells. (NS) Representative flow cytometric plots of CD45.2 + CD4 + cells, showing % Tregs. (NS) CTLA-4 MFI values for each chimeric mouse. (ชม) Representative intracellular CTLA-4 histograms. (ผม) Representative intracellular FOXP3 histograms. (NS) Representative CD25 histograms. Statistical analysis was carried out using NS-test between mice or paired NS-test when cells were from the same chimeric mouse: *NS<0.05 **NS<0.01 ***NS<0.001 ****NS<0.0001. NS=5 per group. Data are representative of one experiment.

Response of LRBA-deficient mice to chronic systemic viral infection. C57BL/6 Lrba +/+ (WT) (red) or Lrba −/− mice (blue) were infected intravenously with 2 × 10 6 plaque-forming unit (PFU) LCMV clone 13 to induce chronic viral infection. At 20 days after infection, spleen cells were analysed by flow cytometry. (NS) Analysis plots of spleens, showing % of lymphocytes that are CD44 hi effector/memory cells in individual mice with arithmetic means. (NS และ ) Representative flow cytometric plots (NS) and anlaysis plots () showing % of CD8 + T cells binding MHC I tetramers loaded with LCMV peptides GP33–41 or NP396–404, or the % of CD4 + cells binding MHC II tetramers fused with LCMV peptide GP66–77 in individual mice with arithmetic means. (NS) Representative histograms showing TIM3 staining on NP396–404 MHC I tetramer-binding CD8 + T cells in WT and Lrba −/− mice, and MFIs in individual animals for TIM3, CD160 and PD-1. Similar trends were seen with the GP33–41 tetramer. (อี) Representative LY6C staining on GP66–77 MHC II tetramer-binding CD4 + T cells, and MFI's in individual animals for LY6C, PSGL1 and PD-1. (NS) IFNγ + MFI of the IFNγ + T cells (top) and % TNFα + within the IFNγ + cells. Representative IFNγ and TNFα histograms are shown for the NP396 peptide-stimulated cells. Statistical analysis was carried out using NS-test: *NS<0.05 **NS<0.01. NS=5 per group. Data are representative of one experiment. IFNγ, interferon-γ.

Normal GC formation and affinity maturation by LRBA-deficient B cells. CD45.1 congenic C57BL/6 recipient mice, with WT LRBA, were injected intravenously with 30 000 HyHEL10 + SWHEL spleen B cells from Lrba −/− หรือ Lrba +/+ C57BL/6 donor mice. The recipient mice were immunised two times on days 0 and 4 after B-cell transfer with HEL 3X -SRBC, or unconjugated SRBC for a control group of recipients, and spleen cells were analysed by flow cytometry, sorting and single-cell Igh sequencing on day 15. (NS) Total Fas hi CD38 − B220 + GC B cells per spleen of individual mice, and arithmetic mean for each group. (NS) Donor-derived HyHEL10 + CD45.2 + CD45.1 − GC B cells per spleen. () Affinity-matured cells, measured as % donor-derived GC B cells stained brightly with 200 ng/ml HEL 3X . (NS) IgG1-switched cells, measured as % of donor-derived GC B cells. (อี) Light-zone CD86 + CXCR4 − GC B cells, measured as % of donor-derived GC B cells. (NS) CD86 MFI on donor-derived GC B cells. (NS) Number of VDJชม amino-acid changing or silent nucleotide substitutions per donor-derived GC B cell. (ชม) Percentage of donor-derived GC B cells with affinity-increasing VDJชม mutations S31R, Y53D or Y58F. (ผม) Percentage of donor-derived GC B cells with substitutions at each VDJชม amino-acid position. (NS) Co-occurrence of S31R, Y53D and Y58F mutations (rows) in individual cells (columns) sorted from separate recipient mice (boxes). Data are pooled from two independent experiments with comparable results. NS=9 mice per HEL 3X -immunised group and four unconjugated controls. Statistical analysis was carried out using NS-test: *NS<0.05.

Normal GC formation and affinity maturation by LRBA WT B cells in LRBA-deficient recipients. The 30 000 HyHEL10 + SWHEL B cells from Rag1 −/− CD45.1 congenic mice, with WT LRBA, were injected into the circulation of Lrba −/− (NS=13, blue symbols) or Lrba +/+ (NS=13, red symbols) C57BL/6 recipient mice, so that all T- and B-cell specificities other than the HyHEL10 + B cells were derived from the recipient mice. The recipient mice were immunised two times with HEL 3X -SRBC on days 0 and 4 after B-cell transfer, or unconjugated SRBC for a control group of recipients, and spleen cells analysed by flow cytometry, sorting and single-cell Igh sequencing on day 15. (NS) Total Fas hi CD38 − B220 + GC B cells per spleen of individual mice, and arithmetic mean for each group. (NS) Donor-derived HyHEL10 + CD45.2 − CD45.1 + GC B cells per spleen. () IgG1-switched cells, measured as % of donor-derived GC B cells. (NS และ อี) Relative cell surface of CD86 MFI on (NS) all B220 + B cells or (อี) donor-derived GC B cells, normalised to mean of Lrba +/+ recipient group in each experiment. (NS) Representative plots of donor-derived GC B cells, and gates on light-zone (LZ, CD86 hi CXCR4 lo ) and dark-zone (CD86 lo CXCR4 hi ) GC cells. (NS) Relative cell surface CD86 MFI on LZ donor-derived GC B cells, normalised to mean of Lrba +/+ recipient group in each experiment. (ชม) Number of VDJชม amino-acid changing or silent nucleotide substitutions per donor-derived GC B cell. (ผม) Percentage of donor-derived GC B cells with substitutions at each VDJชม amino-acid position. (NS) Percentage of donor-derived GC B cells with affinity-increasing VDJชม mutations S31R, Y53D or Y58F. (k) Co-occurrence of S31R, Y53D and Y58F mutations (rows) in individual cells (columns) sorted from separate recipient mice (boxes). Data are pooled from two independent experiments with comparable results. Statistical analysis was carried out using NS-test: **NS<0.01 ***NS<0.001.

ชื่อไฟล์ คำอธิบาย
imcb201750-sup-0001.jpgapplication/jpeg, 144.6 KB Supplementary Figure S1
imcb201750-sup-0002.jpgapplication/jpeg, 240.9 KB Supplementary Figure S2
imcb201750-sup-0003.jpgapplication/jpeg, 206.7 KB Supplementary Figure S3
imcb201750-sup-0004.jpgapplication/jpeg, 159.3 KB Supplementary Figure S4
imcb201750-sup-0005.jpgapplication/jpeg, 105.8 KB Supplementary Figure S5
imcb201750-sup-0006.docxapplication/docx, 21.5 KB Supplementary Figure Legends

โปรดทราบ: ผู้จัดพิมพ์จะไม่รับผิดชอบต่อเนื้อหาหรือการทำงานของข้อมูลสนับสนุนใด ๆ ที่จัดทำโดยผู้เขียน คำถามใด ๆ (นอกเหนือจากเนื้อหาที่ขาดหายไป) ควรส่งไปยังผู้เขียนที่เกี่ยวข้องสำหรับบทความ


ดูวิดีโอ: ทฤษฎการคดเลอกโดยธรรมธาตของชารล ดารวน Natural selection by Charles Darwin (กันยายน 2022).


ความคิดเห็น:

  1. Aram

    Many thanks for the information.

  2. Yehoshua

    It is not true.

  3. Narve

    พบว่าวันนี้ฟอรัมนี้และมีการลงทะเบียนเพื่อเข้าร่วมในการอภิปรายคำถามนี้

  4. Migor

    Bravo, I think this sentence is brilliant

  5. Mikajar

    It's quite difficult for me to judge the level of your competence, but you have revealed this topic very deeply and informatively

  6. Cal

    ขอบคุณสำหรับปาฏิหาริย์))

  7. Doukinos

    Usually it takes half a year



เขียนข้อความ